Вакцина для иммунизации диких плотоядных животных против бешенства
Еще фото
Автор (ы):
А.Л. Елаков, к.б.н, старший научный сотрудник / A. Elakov, PhD
Организация(и):
ФГБУ «НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского», Минздрава России / Ivanovsky Institute of Virology Ministry of Health of the Russian Federation
Журнал:
№5-6 — 2013
УДК.619:578.824.11:615.317
Ключевые слова: бешенство диких животных, оральные антирабические вакцины
Key words: rabies of wild animals, oral rabies vaccines
Аннотация
В поддержании и распространении бешенства ведущую роль играют безнадзорные собаки и кошки, а также дикие плотоядные, поэтому основные меры должны быть направлены на борьбу с бешенством у данной категории животных. Для диких животных в РФ применяются различные оральные антирабические вакцины, эффективность которых в местах применения необходимо строго контролировать по наличию в зубной ткани вакцинируемых животных биомаркера (тетрациклин) и наличию у них антирабических антител в сыворотках крови.
Summary
In maintenance and distribution rabies the leading role is played by neglected dogs and cats, and also wild carnivorous therefore the main measures have to be directed on fight against rabies at this category of animals. The different oral rabies vaccines which efficiency in places of application needs to be supervised strictly on existence in teeth of vaccinated animals of a biomarker (tetracycline) and to existence of rabies antibodies in serums are applied to wild animals in the Russian Federation.
В последние 20 лет в Российской Федерации сложилась непростая эпизоотическая ситуация по многим особо опасным инфекциям, однако, на этом фоне ситуация с бешенством не может не вызывать особую тревогу. За короткий период (1997-2007 гг.) число случаев заболевания бешенством среди животных в РФ возросло более чем в 4 раза (с 1052 в 1997 г. до 4860 в 2007 г.) [1]. В 2011-2012 гг. произошло незначительное снижение количества заболевших животных до 3188 и 2799, соответственно.
Однако успокаиваться и говорить о победе над бешенством еще слишком рано.
Анализ эпизоотической ситуации показывает, что в России имеются стойкие природные очаги заболевания, поддерживаемые в первую очередь за счет диких плотоядных (лисица, енотовидная собака и др.), на долю которых приходится около 50% всех регистрируемых в РФ случаев бешенства [1, 5, 6, 16]. В эпизоотический процесс вовлекаются также безнадзорные собаки и кошки, которые на ряду с дикими плотоядными представляют серьезную опасность для человека.
По данным Роспотребнадзора в Российской Федерации за период с 2008 по 2011 гг. зарегистрировано 57 летальных исходов заболеваний людей гидрофобией (бешенством). Источниками заражения людей в 30 случаях (52,6%) явились больные бешенством собаки и кошки, половину из которых составили безнадзорные животные; в 24 случаях (43,6%) — дикие животные (лисицы — 12, енотовидные собаки — 9, волки — 2, дикий кабан — 1).
У одного человека заболевание возникло в процессе ухода за бешеной коровой, а у двоих источник не был установлен [11].
Учитывая крайне высокую степень опасности для человека распространения бешенства среди диких и безнадзорных плотоядных животных, являющихся основным резервуаром и источником данной инфекции, меры борьбы должны быть направлены в первую очередь на снижение, вплоть до полного искоренения, указанного заболевания именно среди этой группы животных.
Обращаясь к мировому, особенно передовому европейскому опыту по ликвидации бешенства, следует отметить, что на сегодняшний день в развитых европейских странах безнадзорных собак и кошек практически нет. Это достигается за счет неукоснительного исполнения законодательства в области содержания домашних животных.
В РФ порядок содержания домашних животных определяется местной администрацией, при этом за его обеспечение никто не отвечает, что влечет за собой многочисленные нарушения. Ситуации, когда хозяева избавляются от надоевших домашних любимцев, просто выбрасывая их на улицу, не являются редкостью. Часто владельцы берут на лето животных на дачу, а, возвращаясь осенью в город, оставляют их без всякого попечительства. В сложившейся ситуации необходимо повысить личную ответственность за содержание и благополучие домашних животных, как среди владельцев, так и со стороны администрации поселений (садоводческих товариществ и др.):
1. в целях упорядочивания содержания домашних животных можно предложить обязательное чипирование всех собак и кошек, что позволит не только полностью их идентифицировать, но и, в случае необходимости, установить и привлечь к ответственности хозяев;
2. еще одной действенной мерой мог бы быть налог на содержание собак и кошек, что, позволило бы с одной стороны повысить ответственность у их владельцев, а с другой – упорядочить контроль за содержанием домашних животных;
3. на сегодняшний день за случаи нападения безнадзорных животных на жителей никто ответственности не несет, поэтому наличие бродячих собак в населенных пунктах и вблизи садовых участков мало кого заботят, по всей видимости, персональную ответственность должны нести представители местной администрации, что, несомненно, повлияет на улучшение ситуации с безнадзорными животными в населенных пунктах.
В целях ограничения численности безнадзорных животных в РФ применяют различные меры: отстрел, отлов с последующей стерилизацией и возвращением и др. Если первая мера представляется неприемлемой как негуманная, то вторая оказалась абсолютно не эффективной [8].
Как показывает практика, скопление безнадзорных животных часто происходит вблизи продуктовых рынков, свалок пищевых отходов, т.е., там, где есть источники пищи. В связи с этим первоочередной мерой по борьбе с бешенством является полная ликвидация открытых источников пищевых отходов (свалок, мусорных куч и т.д.).
Второй составляющей в плане искоренения бешенства должен быть безвозвратный отлов безнадзорных собак и кошек, для чего необходимо создать целую сеть приютов для этих животных, способную вместить всех отлавливаемых животных.
Борьба с бешенством диких плотоядных включает в себя две основных составляющих: регулирование численности и вакцинация с помощью оральных вакцин.
Международное эпизоотическое бюро (МЭБ) рекомендует поддерживать численность лисиц, основных переносчиков бешенства, на уровне не более 1-2 животных на 10 км2, что должно обеспечивать эпизоотическое благополучие территорий. Однако данная рекомендация, основанная на условиях Западной Европы, не учитывает влияния других диких плотоядных, включающихся в процесс распространения бешенства, а также является лишь временной мерой, не обеспечивающей устойчивого эпизоотического благополучия [10].
Тем не менее, до конца 70-х годов прошлого века регулирование численности диких плотоядных являлось единственной действенной мерой борьбы с бешенством [3]. С появлением оральных антирабических вакцин ситуация изменилась. Первые кампании по оральной вакцинации лисиц были проведены в 1978 г. в Швейцарии, а первые документированные положительные результаты в национальных масштабах были получены на территории ФРГ в результате широкомасштабной межгосударственной кампании ОВЛ в 1983-1986 гг. [9]. В качестве приманок использовали куриные головы, внутрь которых помещали пакет из пластика и алюминиевой фольги с вакцинным штаммом SAD и тетрациклином в качестве биомаркера. Позднее широкомасштабные кампании оральной вакцинации были применены в других европейских странах и на сегодняшний день в странах Евросоюза регистрируются только отдельные случаи заболевания бешенством среди диких животных [10].
В условиях России полномасштабные кампании оральной вакцинации не осуществимы как по техническим причинам, так и по финансовым соображениям. Тем не менее, на отдельных территориях оральную вакцинацию проводить не только возможно, но и необходимо. Поэтому в стране были разработаны пероральные антирабические вакцины на базе отечественных штаммов РВ-97 и ТС-80.
Вирусвакцина против бешенства для оральной иммунизации диких плотоядных животных производства ВНИИВВиМ содержит фиксированный штамм вируса бешенства ТС-80, полученный в 1980 г. Сафоновым Г.А. и др., и депонированный в ВГНКИ 17 февраля 1988 г. Данная вакцина выпускается в очень ограниченном объеме и не получила широкого распространения в практике.
Гораздо шире использовались вакцины из штамма РВ-97, полученного в 1999 г. путем адаптации штамма РБ-71 к суспензионной культуре клеток ВНК-21/2, и депонированного в ВГНКИ 30 апреля 1999 г. из данного штамма сначала готовили вакцину «Синраб», содержащую в составе брикета приманки отходы биологического производства. В последующем, вакцину из штамма РВ-97 стали производить на базе ПЗБ и Щелковского биокомбината в промышленных объемах под названием «Вирус-вакцина для оральной иммунизации диких плотоядных животных против бешенства «Оралрабивак». Благодаря новому составу приманки (говяжий жир и рыбная мука, служащие для привлечения диких плотоядных животных, парафин, обеспечивающий поддержание формы приманки, и производные тетрациклина, предназначенные для контроля поедаемости приманок в качестве биомаркера) удалось добиться повышения привлекательности вакцины для целевых животных.
Поскольку основными критериями при выборе штамма, применяемого для приготовления живых вакцин, являются безопасность и иммуногенность [16], большим недостатком вакцин из штаммов ТС-80 и РВ-97 является их остаточная вирулентность для грызунов [2,12].
Поскольку ветеринарные службы не в состоянии дифференцировать эпизоотические изоляты от вакцинных штаммов вируса, то при появлении сообщений о случаях бешенства среди грызунов некоторые специалисты стали говорить о не эффективности и даже вредности оральной вакцинации диких плотоядных [4]. Тем не менее, работа в области оральной вакцинации диких животных против бешенства продолжалась.
В 2008 году в РФ был депонирован безопасный для животных (в том числе и для грызунов) генномодифицированный штамм ERA G333, полученный в Центре по контролю болезней (Атланта, США) д-ром Ву и д-ром Руппрехтом путем замены аргинина в позиции 333 эктодомена гликопротеина исходного штамма ERA на глютаминовую кислоту, и переданный в рамках Международного проекта в ОАО «Покровский завод биопрепаратов». Данный штамм оказался пригоден для изготовления живых и инактивированных антирабических вакцин для животных, поэтому на его основе была разработана и зарегистрирована в РФ «Вакцина для оральной иммунизации диких плотоядных животных против бешенства «Рабивак-О/333» [7].
Кроме того, в 2010 г. в РФ была зарегистрирована вакцина Раборал V-RG производства фирмы «Мериал» (Франция), содержащая рекомбинантный вирус осповакцины (штамм V-RG-187XP) экспрессирующий гликопротеин вируса бешенства. Пластиковый контейнер с вакциной помещен внутрь приманки на основе рыбной муки. Большим достоинством данной вакцины являются её безвредность и стабильность во внешней среде.
Широкомасштабное распространение живых антирабических вакцин требует пристального контроля за их безопасностью и эффективностью. Применяемые в РФ оральные вакцины проходят обязательный контроль на безвредность для целевых животных в течение не менее 90 суток и биологическую активность в культуре клеток.
При оценке эффективности оральной вакцинации в полевых условиях используют два основных метода: определение наличия тетрациклина, используемого в качестве маркера поедаемости оральных антирабических вакцин, в зубной ткани и костях целевых животных отстрелянных в зонах вакцинации, а также определение у них титра антирабических антител [9].
Традиционный метод определения вируснейтрализующих антител — реакция нейтрализации на белых мышах или в культуре клеток трудоемки, продолжительны по времени и требуют больших материальных затрат для определения антирабических антител в блок-ИФА была разработана и апробирована в полевых условиях универсальная иммуноферментная тест-система, не требующая наличия антивидовых пероксидазных конъюгатов к каждому виду животного [13-15].
К сожалению, в Российской Федерации до сих пор не принята государственная программа по борьбе с бешенством, что существенно затрудняет ликвидацию данного заболевания на всей её территории.
Литература
1. Бардина Н.С., Титов М.А., Караулов А.К. и др. Бешенство в России. Оценка риска. Информационно-аналитический обзор // Владимир: ФГУ «ВНИИЗЖ», 2008,
2. Борисов А.В. Разработка технологии изготовления вирусвакцины против бешенства диких плотоядных: Автореф. дис… канд. вет. наук / Всерос. НИИ защиты животных: Владимир, 2003.
3. В.А. Ведерников, В.А. Седов, Э.В. Ивановский. Бешенство животных //Москва, — Колос. 1974.
4. В.А. Ведерников, И.В. Балдина, М.И. Гулюкин. Бешенство в России. Важные особенности современной эпизоотической ситуации //Тезисы Всероссийской научно-практической конференции «Вакцинология, 2010. Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней». Москва, 9-10 ноября 2010 г. С. 31-32.
5. Дудников С.А. Лисицы как маркер риска при бешенстве: II Противоэпизоотические мероприятия // Труды конференции ВНИИВВиМ, г. Покров, 2003 г. С. 69-73.
6. Елаков А.Л., Семенова М. А., Розанова И. И. Случаи бешенства в Москве в 2000-2010 годах // Материалы Международной научно-практической конференции «Ветеринарная медицина XXI века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения», посвященной Всемирному году ветеринарии в ознаменование 250-летия профессии ветеринарного врача, 8-10 июня 2011 года – Ульяновск, 2011 – С. 85-88.
7. Елаков А.Л., Уласов В.И. Баньковский Д.О., Сафонов Г.А. Изучение биологических свойств штамма «ERA G333» вируса бешенства // Ветеринария. 2011. №2. С. 22-25.
8. А. А. Заволока О регулировании численности бездомных животных из-за проблем с бешенством // VetPharma, 2013, №4, С. 25-27.
9. В.В. Макаров Оральная вакцинация лисиц против бешенства безальтернативна // Ветеринарная патология. 2009. №4. С. 104-107.
10. Метлин А.Е., Чернышева Е.В., Рыбаков С.С. Бешенство животных: эпизоотология, меры борьбы и перспективы // Ветеринария Кубани. 2009. №6. С. 2-4.
11. Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 1 февраля 2012 г. № 13 «Об усилении мероприятий, направленных на профилактику бешенства в РФ»
12. Сливко И.А. Иммунобиологические свойства вакцинных штаммов ТС-80 и 71 БелНИИЭВ-ВГНКИ вируса бешенства: Автореф. дис…канд. вет. наук / Всерос. НИИ вет. вирусологии и микробиологии: Покров, 2003.
13. Хисматуллина Н.А., Гулюкин А.М., Сабирова В.В., Гафарова А.З., Елаков А.Л. Разработка и применение блок-иммуноферментной тест-системы для контроля эффективности вакцинопрофилактики бешенства // Ветеринарна медицина. Мiжвiдомчий тематичний науковий збiрник. Вып. 96. 2012 г. – Украина, г. Харкiв — С. 64-66.
14. Н.А. Хисматуллина, Т.П. Петрова, А.М. Гулюкин, В.В. Сабирова, А.З. Гафарова, Ш.М. Насыров, М.И. Маркова, А.Л. Елаков. Контроль эффективности вакцинопрофилактики бешенства дикой фауны на территории Калининградской области РФ //Ветеринарный врач. 2012. №6, С.8-11
15. Н.А.Хисматуллина, А.М.Гулюкин, В.В.Сабирова, А.З.Гафарова, М.Насыров, М.И.Маркова, А.Л.Елаков, С.Р.Кулакова, И.В.Амирова. Контроль эффективности вакцинопрофилактики бешенства дикой фауны на территории Смоленской области РФ// Труды ВИЭВ. – Москва, 2013; Т.77 – С. 197-200.
16. Шестопалов А. М. Экологический полиморфизм и территориальная значимость различных вирусных патогенов: Автореф. дис. докт. биол. наук / Новосибирск, 2010.
17. K. Habel. Общие соображения относительно определения безвредности и иммуногенности / Методы лабораторных исследований по бешенству. Третье издание. Всемирная организация здравоохранения, Женева, 1975.
Назад в раздел
Источник
В статье приводятся данные по перспективности иммунопрофилактики плотоядных животных пероральной вакцинацией против бешенства. На диких плотоядных животных были изучены иммуногенные свойства тканевой и культуральной вакцин установлено, что оба вида вакцин обладают в достаточной степени иммуногенными свойствами, вызывали образование в высокой степени рабицидных антител.
Введение
Бешенство — это острое вирусное инфекционное заболевание, общее для человека и животных, вызывающее тяжелое поражение нервной системы и 100% смертельный исход. Восприимчивы домашние и дикие животные всех видов, а также человек. Источником вируса бешенства являются дикие и домашние животные. Разносят бешенство из региона в регион мигрирующие дикие звери, которые могут контактировать с домашними.
К диким животным относятся — волки, лисы, енотовидные собаки, барсуки, летучие мыши, грызуны, к домашним — собаки, кошки, лошади, свиньи, мелкий и крупный рогатый скот. Количество домашних и диких животных, больных бешенством, в настоящее время растет во всем мире [1, 2, 3].
Главным резервуаром и источником возбудителя бешенства являются дикие животные (волки, лисы, еноты, песцы, хорьки и др.), бродячие собаки и кошки. В природных очагах Европы, прежде всего, болеют лисицы, енотовидные собаки, волки, шакалы, куницы, барсуки; в Северной Америке — лисицы, скунсы; в Центральной и Южной Америке — летучие мыши-вампиры; в Азии — волки, лисицы, шакалы, еноты и многие другие хищники. В природных очагах заражаются от диких животных, формируют городские и сельские очаги собаки и кошки [4, 5].
Заражение домашних животных происходит обычно при их непосредственном контакте с больными представителями дикой фауны и безнадзорными собаками и кошками. Домашние животные, как и человек, заражаются через укус или при ослюнявливании поврежденной поверхности кожного покрова.
Вирус бешенства непродолжительное время находится на месте внедрения, затем проникает в спинной и головной мозг, оттуда попадает в слюнные железы, где размножается на нервных узлах. Затем он выходит в протоки слюнных желез и на поверхность слизистой оболочки, заражая слюну. Вирус проникает также в область глаз, легкие, надпочечники, почки, скелетные мышцы, поджелудочную железу, молочные железы (выделяется с молоком).
Симптомы бешенства появляются лишь после распространения вируса по всему организму животного.
Наиболее характерные признаки заболевания — слюнотечение, агрессивность, параличи. Бешенство у животных может протекать в буйной и тихой форме. Наиболее опасная тихая форма бешенства, при которой признаки заболевания выражены слабо, поэтому ее поздно распознают и не принимают мер предосторожности [6, 7].
Ветеринарно-продовольственный департамент Эстонии сообщил сегодня о том, что начнет весеннюю вакцинацию от бешенства диких животных – лис и енотовидных собак. Вакцина в приманках будет разбрасываться с малых самолетов. Предыдущая вакцинация проводилась осенью. Вакцинация популяций диких животных осуществляется в Эстонии с осени 2005 года.
Опыт европейских стран показал, что наиболее успешный способ борьбы с бешенством диких животных — оральная вакцинация. Раскладка вакцины является наиболее перспективным способом решения проблемы иммунизации плотоядных животных против бешенства. По внешнему виду приманка представляет собой цилиндр или параллелепипед серого или темно-коричневого цвета. Изготавливается из продуктов съедобных для плотоядных животных и обладает специфическим запахом для их привлечения. Брикет изготовлен таким образом, что животное не может его проглотить целиком и раскусывает. Целостность капсулы с вакциной нарушается, и содержимое попадает на слизистую ротовой полости животного и, проникая в организм, формирует иммунный ответ на 21 день после вакцинации. В целях контроля поедаемости приманок в их состав введен биомаркер (тетрациклин), накапливающийся и сохраняющийся пожизненно в зубах и костных тканях животного и обнаруживаемый флюоресцентным методом при мониторинговых исследованиях [8, 9].
Материал и методы
Объектами исследования были корсаки – степные лисицы. Испытывалась тканевая вакцина, изготовленная нами из мозга овец и культуральная вакцина, полученная на культурах из ткани почки. Напряженность иммунитета у диких плотоядных животных изучали 1 и 2-кратной пероральной вакцинацией [10].
Степень иммуногенности вакцин определяли серологическими исследования титров антител против бешенства в сыворотке крови у иммунизированных животных определяли в реакций диффузной преципитаций и нейтрализации интрацеребральным методом на белых мышах.
Результаты исследования
Изучение иммуногенности разработанных пероральных вакцин проводили на 9 корсаках. Результаты исследования иммунизации приведены в таблице 1.
Таблица 1 – Титры антирабицидных антител после пероральной вакцинации плотоядных животных
Исследованиями установлено, что пероральные вакцины, как тканевые, так и культуральные при однократном и двукратном скармливаний вызывают образование специфических антирабицидных антител в достаточно высоких титрах.
Наиболее высокие титры антител против бешенства были установлены у животных, которым применяли тканевую пероральную вакцину. У них титры антител были при однократной вакцинации в пределах 6,8±0,4 и при двукратной — 8,5±0,8.
У подопытных животных, которым применяли культуральные вакцины, при однократной вакцинаций титры антирабицидных антител были в пределах показателей 5,9±0,8 и при двукратной вакцинаций 10,5±2,1.
У контрольных животных, которые не были вакцинированы, специфические антирабицидные антитела не выявлены.
Проверку рабицидной активности сыворотки крови у вакцинированных животных проводили путем титрации на белых мышах. Для титрации вакцины брали 80 мышей в трех недельном возрасте, весом 12-13 граммов из расчета по 30 мышей для одного вида вакцины и разделили их на 2 группы по 5 мышей в каждой. Результаты проверки иммуногенности пероральных антирабических вакцин в реакций нейтрализаций приведены в таблице 2.
Таблица 2 — Проверка антирабицидных свойств сыворотки крови перорально вакцинированных собак на белых мышах в реакций нейтрализаций
Оба вида антирабических пероральных вакцин обеспечила сохранность на 100% зараженных фикс — вирусом животных. Все мыши, которым ввели разведения сывороток крови полученного от иммунизированных пероральными вакцинами остались живыми. Все белые мыши служившие контролем погибли.
Полученные нами пероральные вакцины обладают в досточной степени иммуногенными свойствами и можно применять для профилактики бешенства диких плотоядных животных.
Литература
- Шестопалов А.М., Кисурина М.И., Груздев К.Н. Бешенство и его распространение в мире. /Вопр. вирусологии, 2001. № 2. С. 7-12.
- Aguilar-Setin , Brohie B., Tordo N. (1997) Oral immunization of vampire bats with vaccine rabies glykoprotein recombinant virus vaccine and response to challenge with vampire rabies virus vaccine strain. In Abstracts of International Rabies Meeting, 5-8 July 1997. Paris, Р. 68-75.
- Biswas , Reddy G.S., Srinivasan V.A., Rangarajan P.N. Preexposure efficacy of a novel combination DNA and inactivated rabies virus vaccine. //Hum. Gene Ther., 2001. N 10: Р. 1917- 1922.
- Black M., McElhiney L.M., Lowings J.P., Smith J., Johnstone P., Heaton P.R. Molecular methods to distinguish between classical rabies and the rabies-related European bat lyssaviruses. //J. Virol. Methods, 2000 N 87 V. 123-131.
- Bourhy H., Kissi B., Tordo N. Molecular diversity of lissavirus genus. //Virology, N 194 V. 70-81.
- Blancon J. Модифицированные живые рабические вакцины для оральной иммунизации плотоядных // Laboratory Techn in Rabies -Geneva 1996. P.
- Исакова Н.В. Вирусвакцина и приманка для пероральной иммунизации диких плотоядных против бешенства. //Зооантропонозные болезни, меры профилактики и борьбы: материалы Междунар. науч.-практ. конф. Минск, 1997. — С. 27-28.
- Dedek L. Вакцины, применяемые в Европе для оральной иммунизации лисиц против бешенства. 1993, V. 43, № 10, Р. 368-369.
- Хрипунов Е.М. Влияние стабилизирующих веществ на иммуногенность антирабической вакцины орального применения. //Болезни диких животных: материалы Междунар. науч.-прак. конф. / ГНУ ВНИИВВиМ. — Покров, 2004. — С. 163-166.
- Рожаев Б.Г., Муралинов К.К. Способ получение пероральной вакцины против бешенства плотоядных животных/ Инновационный патент № 26221, выдан 10.2012 Авторское свидетельство № 75428.
Фамилия автора: Рожаев Б.Г.
Источник